Ελεύθερα κυκλοφορούντα καρκινικά κύτταρα. Μοριακός έλεγχος για ανίχνευση ελεύθερων κυκλοφορούντων καρκινικών κυττάρων στο περιφερικό αίμα.
Το τεστ «μοριακός έλεγχος για ανίχνευση ελεύθερων κυκλοφορούντων καρκινικών κυττάρων και ογκολογικών παραγόντων σε περιφερικό αίμα», γίνεται και στην Ελλάδα.
Αποτελεί ένα σημαντικό εργαλείο, για την παρακολούθηση της αποτελεσματικότητας της θεραπείας στον ογκολογικό ασθενή, αλλά και της πρόγνωσης για την έκβαση της νόσου του.
Γιατί, η έρευνα και η επιστήμη εξελίσσεται και στην Ελλάδα.
ΜΕΘΟΔΟΛΟΓΙΑ ΤΗΣ ΥΓΡΗΣ ΒΙΟΨΙΑΣ
Πραγματοποιείται απομόνωση του ολικού RNA (total RNA), από 1ml περιφερικού αίματος με το αντιδραστήριο Trizol-BD.
Aκολούθως, πραγματοποιείται πέψη τυχόν μορίων DNA από την απομόνωση του RNA, κατόπιν επώασης με το ένζυμο DNAse Ι (RNAse-free).
Στη συνέχεια, γίνεται μετατροπή του ολικού RNA σε συμπληρωματικό DNA (cDNA), με το ένζυμο αντίστροφη μεταγραφάση (reverse transcriptase).
Εφαρμόζεται η μέθοδος της ποσοτικής qRT-PCR, σε πραγματικό χρόνο, με σκοπό το συγκριτικό προσδιορισμό της γονιδιακής έκφρασης (gene expression) των γονιδίων που κωδικοποιούν:
1) την Guanyl Cyclase C (GCC)
2) το αντιγόνο CD24
3) το αντιαποπτωτικό γονίδιο survivin
4) την κυτταρική γλυκοπρωτεΐνη mucin1
5) την κυτταροκερατίνη 19 (CK-19)
6) την κυττοκερατίνη 20 (CK-20)
7) το καρκινοεμβρυϊκό αντιγόνο (CEA) και
8) το γονίδιο αναφοράς GAPDH (glyceraldehyde phosphate dehydrogenase)
Και άλλα πολλά γονίδια μπορούν να ελεγχθούν…
Ο προσδιορισμός πραγματοποιείται, έχοντας σαν template τα συντιθέμενα cDNAs, σύμφωνα με δημοσιευμένες εργασίες και σε σύγκριση με αντίστοιχα cDNAs δείγματος υγιούς κοντρόλ.
Οι εκκινητές DNA (οligos), που χρησιμοποιούνται για τα ελεγχόμενα mRNAs, προέρχονται από την IDTDNA (USA).
Σαν controls, για την αντίδραση PCR και των εκκινητών, χρησιμοποιούνται cDNAs από αντίστοιχο δείγμα αίματος υγιούς ατόμου.
Σαν αρνητικό control, για την αντίδραση PCR, χρησιμοποιείται cDNA από το εξεταζόμενο δείγμα χωρίς εκκινητές.
Τα αποτελέσματα, τέλος, αξιολογούνται κατάλληλα, σε συνδυασμό με τα υπόλοιπα κλινικά κι εργαστηριακά ευρήματα του ασθενούς.
Διαβάστε περισσότερα, πατώντας, εδώ, για το Σωτήρη Νικολόπουλο
Πατήστε, εδώ, για τα βρείτε εύκολα τα βιολογικά σκευάσματα για τον καρκίνο
Τα καλύτερα, βιολογικά σκευάσματα για τον καρκίνο
Παρόμοια άρθρα, που μπορεί να σας ενδιαφέρουν
Κυκλοφορούντα καρκινικά κύτταρα
Πώς ένα τσιπ ανιχνεύει τον καρκίνο
Θεραπείες καρκίνου για κάθε ασθενή εξατομικευμένα
Στοχευμένες θεραπείες στον καρκίνο
Γονιδιακή έκφραση και ανάλυση μεταλλάξεων όγκων
Έξυπνα τσιπάκια που μιμούνται ανθρώπινα όργανα
Οι τεχνικές εξατομικευμένης θεραπείας του καρκίνου
Προγνωστικοί παράγοντες στον καρκίνο
Πώς η βιοψία και το χειρουργείο βοηθούν στην εξάπλωση του καρκίνου
Θεραπεία του μεταστατικού καρκίνου
Βιοψία για τον καρκίνο μέσω του αίματος
